Konkretne etapy hodowli komórkowej

1. Wspólne wyposażenie

1. Sprzęt w pomieszczeniu przygotowawczym

Destylator wody destylowanej jednodestylowanej, destylator wody podwójnie destylowanej, zbiornik kwasu, piekarnik, szybkowar, szafa magazynowa (do przechowywania artykułów niesterylizowanych), szafa magazynowa (do przechowywania artykułów sterylizowanych), stół do pakowania.Wyposażenie pomieszczenia przygotowania roztworów: waga skrętna i waga elektroniczna (wagowanie), miernik PH (pomiar wartości PH roztworu hodowlanego), mieszadło magnetyczne (konfiguracja pomieszczenia do mieszania roztworu).

2. Wyposażenie sali kultury

Zbiornik na ciekły azot, szafka do przechowywania (do przechowywania różnych rzeczy), lampa fluorescencyjna i lampa ultrafioletowa, system oczyszczania powietrza, lodówka niskotemperaturowa (- 80 ℃), klimatyzator, butla z dwutlenkiem węgla, stolik boczny (pisanie zapisów z testów).

3. Sprzęt, który należy umieścić w sterylnym pomieszczeniu

Wirówka (zbieranie komórek), ultraczysty stół roboczy, mikroskop odwrócony, inkubator CO2 (inkubacja hodowli), łaźnia wodna, maszyna do dezynfekcji i sterylizacji trójtlenowej, lodówka 4 ℃ (umieszczenie surowicy i roztworu hodowli).

2. Działanie aseptyczne

(1) Sterylizacja sterylnego pomieszczenia

1. Regularnie sprzątaj sterylne pomieszczenie: raz w tygodniu najpierw wytrzyj podłogę wodą z kranu, wytrzyj stół i wyczyść stół roboczy, a następnie przetrzyj 3 ‰ lizolu lub bromogeraminy lub 0,5% kwasu nadoctowego.

2. Sterylizacja inkubatora CO2 (inkubatora): najpierw przetrzeć 3 ‰ bromogeraminą, następnie przetrzeć 75% alkoholem lub 0,5% kwasem nadoctowym, a następnie naświetlić lampą ultrafioletową.

3. Sterylizacja przed eksperymentem: włącz lampę ultrafioletową, sterylizator trójtlenowy i system oczyszczania powietrza odpowiednio na 20-30 minut.

4. Sterylizacja po doświadczeniu: ultra czysty stół, stolik boczny i odwrócony stolik mikroskopu przetrzeć 75% alkoholem (3 ‰ bromogeraminy).

Przygotowanie personelu laboratorium do sterylizacji

1. Umyj ręce mydłem.

2. Noś odzież izolacyjną, czepki izolacyjne, maseczki i kapcie.

3. Wytrzyj ręce wacikiem na bazie 75% alkoholu.

Demonstracja sterylności operacji

1. Wszystkie butelki z alkoholem, PBS, pożywką i trypsyną przyniesione na ultra czysty stół warsztatowy należy przetrzeć 75% alkoholem na zewnętrznej powierzchni butelki.

2. Działaj w pobliżu płomienia lampy alkoholowej.

3. Naczynia przed użyciem należy wysterylizować.

4. Przybory kuchenne (takie jak zakrętki do butelek i zakraplacze), które są w dalszym ciągu używane, należy umieścić na dużej wysokości i w dalszym ciągu przegrzewać podczas użytkowania.

5. Wszystkie operacje powinny odbywać się blisko lampy alkoholowej, a działanie powinno być lekkie i dokładne i nie powinno być losowo dotykane.Jeśli słomka nie może dotknąć zbiornika na ścieki.

6. Podczas zasysania więcej niż dwóch rodzajów cieczy należy zwrócić uwagę na wymianę rury ssącej, aby zapobiec zanieczyszczeniu krzyżowemu.

Informacje na temat dezynfekcji narzędzi można znaleźć w następnym rozdziale.