Reakcja łańcuchowa polimerazy, w skróciePCRw języku angielskim to technika biologii molekularnej stosowana do amplifikacji określonych fragmentów DNA.Można to uznać za specjalną replikację DNA poza organizmem, która może znacznie zwiększyć bardzo małą ilość DNA.Przez całyPCRW procesie reakcji istotną rolę odgrywa jedna klasa substancji – enzymy.
1. Taq DNA
W eksperymentach na początkuPCRnaukowcy wykorzystali polimerazę DNA I Escherichia coli, ale jest problem z tym enzymem: musi on uzupełniać nowy enzym za każdym razem, gdy wykonywany jest cykl, co sprawia, że etapy operacji są nieco skomplikowane i trudno jest w pełni automatycznie amplifikować.Problem ten został rozwiązany po tym, jak naukowcy przypadkowo wyizolowali polimerazę DNA Taq z Thermus aquaticus w 1988 roku. Od tego czasu automatyczna amplifikacja DNA stała się rzeczywistością.Odkrycie tego enzymu również sprawiaPCRtechnologia wygodna, praktyczna i uniwersalna technologia.Obecnie najpowszechniejszą polimerazą w zestawach DNA jest polimeraza Taq DNA.
2. PfuDNA
Jak wspomniano powyżej, DNaza Taq ma duży błąd, dlatego naukowcy zmodyfikowali polimerazę DNA Taq w pewnym stopniu, aby uniknąć nieswoistej amplifikacji spowodowanej niedopasowaniem, co skutkowało niedokładnymi wynikami testów.Jednak modyfikacja polimerazy DNA Taq może hamować aktywność polimerazy DNA w temperaturze pokojowej.Polimeraza PfuDNA może z powodzeniem zrekompensować powyższe wady polimerazy DNA Taq, dzięki czemu reakcję PCR można przeprowadzić normalnie i można skutecznie poprawić skuteczność amplifikacji genu docelowego.
3. Odwrotna transkryptaza
Odwrotną transkryptazę odkryto w 1970 roku. Enzym ten wykorzystuje RNA jako matrycę, dNTP jako substrat, działa na zasadzie parowania zasad i syntetyzuje pojedynczą nić DNA komplementarną do matrycy RNA w kierunku 5′-3′.Odwrotna transkryptaza zależy przede wszystkim od aktywności polimerazy DNA z matryc DNA lub RNA i dlatego nie ma aktywności egzonukleazy 3′-5′.Posiada jednak aktywność RNazy H, która w pewnym stopniu ogranicza długość syntezy odwrotnej transkryptazy.Ze względu na niską wierność i termostabilność dzikiej odwrotnej transkryptazy naukowcy zmodyfikowali ją również.
DlaPCReksperymentów, głównymi materiałami eksploatacyjnymi są: pojedyncza probówka do PCR, probówka do PCR z 4/8 paskami, płytki do PCR.
LabioMateriały eksploatacyjne do PCRmieć następującezalety:
Płytki do PCR: Szeroka kompatybilność z termocyklerami;Wysoki kontrast, łatwa identyfikacja studni;dobrze odbicie fluorescencji; dobreprzenikanie ciepła;Certyfikowane DNazy, RNazy, DNA, inhibitory PCR i testowane jako wolne od pirogenów.
Pojedyncze probówki do PCR: Odporny na parowanie; dobryprzenikanie ciepła;doskonała przejrzystość optyczna; Certyfikowane DNazy, RNazy, DNA, inhibitory PCR i przetestowane jako wolne od pirogenów.
Probówki do PCR 4/8 pasków: Ultracienkie ścianki, wysoka przejrzystość, dobre odbicie fluorescencji;można stosować w przemyśle farmaceutycznym, spożywczym i biologii molekularnej;wysokiej jakości pierwotny materiał PP;certyfikowane DNazy, RNazy, DNA, inhibitory PCR i przetestowane jako wolne od pirogenów.
Czas publikacji: 09 czerwca 2023 r