Wprowadzenie do powszechnych pożywek mikrobiologicznych (I)
Pożywka hodowlana to rodzaj mieszanej matrycy odżywczej, sztucznie przygotowanej z różnych substancji zgodnie z potrzebami wzrostu różnych drobnoustrojów, która służy do hodowli lub oddzielania różnych mikroorganizmów.Dlatego też matryca odżywcza powinna zawierać składniki odżywcze (w tym źródło węgla, źródło azotu, energię, sól nieorganiczną, czynniki wzrostu) oraz wodę, która może być wykorzystana przez mikroorganizmy.W zależności od rodzaju mikroorganizmów i celu doświadczenia wyróżnia się różne rodzaje i sposoby przygotowania pożywek.
Niektóre popularne pożywki hodowlane w eksperymencie wprowadza się w następujący sposób:
Odżywcze podłoże agarowe:
Pożywka agarowa odżywcza służy do rozmnażania i hodowli pospolitych bakterii, do oznaczania całkowitej liczby bakterii, konserwacji gatunków bakterii i czystej kultury.Główne składniki to: ekstrakt wołowy, ekstrakt drożdżowy, pepton, chlorek sodu, agar w proszku, woda destylowana.Pepton i proszek wołowy dostarczają azotu, witamin, aminokwasów i węgla, chlorek sodu może utrzymać zrównoważone ciśnienie osmotyczne, a agar jest koagulantem pożywki hodowlanej.
Agar odżywczy to najbardziej podstawowy rodzaj podłoża hodowlanego, które zawiera większość składników odżywczych niezbędnych do wzrostu drobnoustrojów.Agar odżywczy można stosować do rutynowych hodowli bakteryjnych.
Podłoże agarowe z krwią:
Pożywka agarowa z krwią jest rodzajem pożywki peptonowej z ekstraktem wołowym, zawierającej odwłóknioną krew zwierzęcą (zwykle krew króliczą lub krew owczą).Dlatego oprócz różnych składników odżywczych niezbędnych do hodowli bakterii, może również dostarczać koenzym (taki jak czynnik V), hem (czynnik X) i inne specjalne czynniki wzrostu.Dlatego też podłoże do posiewu krwi jest często wykorzystywane do hodowli, izolacji i konserwacji niektórych mikroorganizmów chorobotwórczych wymagających pożywienia.
Ponadto do badania hemolizy zwykle stosuje się agar z krwią.Podczas procesu wzrostu niektóre bakterie mogą wytwarzać hemolizynę, która rozbija i rozpuszcza czerwone krwinki.Kiedy rosną na płytce krwi, wokół kolonii można zaobserwować przezroczyste lub półprzezroczyste pierścienie hemolityczne.Patogeniczność wielu bakterii jest związana z właściwościami hemolitycznymi.Ponieważ hemolizyna wytwarzana przez różne bakterie jest inna, zdolność hemolityczna jest również inna, a zjawisko hemolizy na płytce krwi jest również inne.Dlatego do identyfikacji bakterii często stosuje się test hemolizy.
Medium TCBS:
TCBS to podłoże agarowe z tiosiarczanem i cytrynianem, solą żółciową i sacharozą.Do selektywnej izolacji patogennych wibrio.Pepton i ekstrakt drożdżowy stosuje się jako podstawowe składniki odżywcze w pożywce hodowlanej w celu zapewnienia źródła azotu, źródła węgla, witamin i innych czynników wzrostu niezbędnych do wzrostu bakterii;Wyższe stężenie chlorku sodu może zaspokoić potrzeby halofilnego wzrostu vibrio;Sacharoza jako fermentowalne źródło węgla;Cytrynian sodu, środowisko zasadowe o wysokim pH i tiosiarczan sodu hamują rozwój bakterii jelitowych.Sproszkowana żółć krowia i tiosiarczan sodu hamują głównie rozwój bakterii Gram-dodatnich.Ponadto tiosiarczan sodu stanowi również źródło siarki.W obecności cytrynianu żelaza bakterie mogą wykryć siarkowodór.Jeżeli obecne są bakterie produkujące siarkowodór, na płytce powstanie czarny osad;Wskaźnikami podłoża TCBS są błękit bromokrezolowy i błękit tymolowy, które są wskaźnikami kwasowo-zasadowymi.Błękit bromokrezolowy jest wskaźnikiem kwasowo-zasadowym o zakresie zmiany pH od 3,8 (żółty) do 5,4 (niebiesko-zielony).Istnieją dwa zakresy przebarwień: (1) zakres kwasowy wynosi pH 1,2 ~ 2,8, zmieniając się z żółtego na czerwony;(2) Zakres zasad wynosi pH 8,0 ~ 9,6, zmieniając kolor z żółtego na niebieski.
Podłoże agarowe z peptonem sojowym i serem TSA:
Skład TSA jest podobny do składu agaru odżywczego.W normie krajowej służy zwykle do badania bakterii osadzających się w czystych pomieszczeniach (obszarach) przemysłu farmaceutycznego.Wybierz punkt testowy w obszarze, który ma być testowany, otwórz płytkę TSA i umieść ją w punkcie testowym.Próbki należy pobierać po wystawieniu na działanie powietrza przez ponad 30 minut przez różny czas, a następnie hodować w celu zliczenia kolonii.Różne poziomy czystości wymagają różnej liczby kolonii.
Agar Muellera-Hintona:
Pożywka MH jest pożywką mikrobiologiczną stosowaną do wykrywania oporności mikroorganizmów na antybiotyki.Jest to podłoże nieselektywne, na którym może rozwijać się większość mikroorganizmów.Dodatkowo skrobia zawarta w składnikach może absorbować toksyny wydzielane przez bakterie, dzięki czemu nie będzie miała wpływu na rezultaty działania antybiotyku.Skład podłoża MH jest stosunkowo luźny, co sprzyja dyfuzji antybiotyków, dzięki czemu może wykazywać oczywistą strefę zahamowania wzrostu.W chińskiej branży zdrowotnej podłoże MH wykorzystuje się także do testów wrażliwości na leki.Podczas przeprowadzania testu wrażliwości na leki w przypadku niektórych specjalnych bakterii, takich jak Streptococcus pneumoniae, do pożywki można dodać 5% krwi owczej i NAD, aby spełnić różne wymagania żywieniowe.
Agar SS:
Agar SS jest zwykle używany do selektywnej izolacji i hodowli Salmonelli i Shigella.Hamuje bakterie Gram-dodatnie, większość bakterii z grupy coli i proteus, ale nie wpływa na rozwój salmonelli;Tiosiarczan sodu i cytrynian żelaza służą do wykrywania wytwarzania siarkowodoru, który powoduje, że środek kolonii staje się czarny;Neutralna czerwień jest wskaźnikiem pH.Kolonia cukru fermentującego wytwarzająca kwas jest czerwona, a kolonia cukru niefermentującego jest bezbarwna.Salmonella to kolonia bezbarwna i przezroczysta z czarnym środkiem lub bez, natomiast Shigella to kolonia bezbarwna i przezroczysta.
Czas publikacji: 04 stycznia 2023 r