Probówka wirówkowa to prosta probówka, która może wytrzymać dużą prędkość obrotową i ciśnienie, np. podczas oddzielania niektórych próbek i oddzielania osadów supernatantu.Rurka wirówki ultrafiltracyjnej składa się z dwóch części podobnych do rurki wewnętrznej i rurki zewnętrznej.Dętka jest membraną o określonej masie cząsteczkowej.Podczas wirowania z dużą prędkością substancje o mniejszej masie cząsteczkowej wyciekną do dolnej probówki (tj. probówki zewnętrznej), a te o większej masie cząsteczkowej zostaną uwięzione w górnej probówce (tj. probówce wewnętrznej).Jest to zasada ultrafiltracji, często stosowana do zagęszczania próbek.
Probówek wirówkowych do ultrafiltracji można zwykle używać bez obróbki wstępnej, ale w przypadku przetwarzania próbek białek, zwłaszcza rozcieńczonych roztworów białek (< 10 ug/ml), stopień odzyskiwania stężenia w przypadku membran ultrafiltracyjnych często nie jest ilościowy.Chociaż materiały PES minimalizują niespecyficzną adsorpcję, niektóre białka, szczególnie gdy są rozcieńczone, mogą powodować problemy.Stopień niespecyficznego wiązania różni się w zależności od struktury poszczególnych białek.Białka zawierające domeny naładowane lub hydrofobowe z większym prawdopodobieństwem wiążą się nieodwracalnie z różnymi powierzchniami.Wstępna obróbka pasywacyjna na powierzchni probówki wirówki ultrafiltracyjnej może zmniejszyć utratę adsorpcji białka na powierzchni membrany.W większości przypadków wstępna obróbka kolumny przed zatężeniem rozcieńczonego roztworu białka może poprawić stopień odzysku, ponieważ roztwór może wypełnić puste miejsca adsorpcji białka odsłonięte na membranie i powierzchni.Metoda pasywacji polega na wstępnym namoczeniu kolumny w większej objętości roztworu pasywacyjnego na czas dłuższy niż 1 godzinę, dokładnym umyciu kolumny wodą destylowaną, a następnie jednokrotnego odwirowania wodą destylowaną w celu całkowitego usunięcia pozostałości roztworu pasywacyjnego, który może pozostać na błonie .Należy uważać, aby po pasywacji nie dopuścić do wyschnięcia folii.Jeśli chcesz go później użyć, musisz dodać sterylną wodę destylowaną, aby folia była wilgotna.
Probówek wirówkowych do ultrafiltracji zazwyczaj nie można sterylizować ani używać ponownie.Ponieważ cena pojedynczej probówki nie jest niska, wiele osób próbuje ją ponownie wykorzystać – doświadczenie polega na wielokrotnym czyszczeniu powierzchni membrany wodą destylowaną i odwirowaniu jej raz lub dwa razy.Małą probówkę, którą można odwirować w odwrotnej kolejności, można zanurzyć w wodzie destylowanej, a następnie odwirować w odwrotnej kolejności kilka razy, co będzie lepsze.Można go wielokrotnie stosować do tej samej próbki i można go namoczyć w wodzie destylowanej, gdy nie jest używany, ale należy zapobiegać zanieczyszczeniu bakteryjnemu.Nie mieszaj różnych próbek.Niektórzy twierdzą, że moczenie w 20% alkoholu i 1n NaOH (wodorotlenek sodu) może zapobiec rozwojowi bakterii i zapobiec wysuszeniu.Dopóki membrana ultrafiltracyjna wnika w wodę, nie można dopuścić do jej wyschnięcia.Inni jednak twierdzą, że zniszczy to strukturę membrany.W każdym razie producenci generalnie nie wspierają ponownego użycia.Powtarzające się użycie zablokuje wielkość porów membrany filtra, a nawet spowoduje wyciek cieczy, co będzie miało wpływ na wyniki eksperymentu.
Czas publikacji: 05 września 2022 r